骨髓基质干细胞复合纳米羟基磷灰石／聚乳酸构建组织工程骨(1)

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     刘雪梅

    [摘要]目的：了解骨髓基质干细胞(MSCs)复合纳米羟基磷灰石/聚乳酸(n—HA/PLA)构建组织工程骨的异位成骨作用。方法：选择6只新西兰白兔，实验组于动物脊柱左侧肌肉内植入MSCs复合n—HA/PLA构建的组织工程骨，对照组于右侧植入n—HA/PLA生物材料。术后4、8周取材，行溴脱氧尿嘧啶(Brdu)标记细胞检测和组织学观察。结果：术后4周，实验组材料边缘均可检测到Brdu标记的MSCs。术后4、8周，实验组材料内部有新骨形成，随着时间推移，新骨量增多，编织骨向板层骨过渡。对照组材料未见新骨形成。结论：MSCs复合n—HA/PLA构建的组织工程骨具有很好的异位成骨作用。

    [关键词]骨髓基质干细胞；纳米羟基磷灰石；聚乳酸；组织工程

    [中图分类号]Q813 [文献标识码]A [文章编号]1008—6455(2007)01—0025-03

    目前对骨组织工程支架材料的研究很多，但尚未找到，种理想的材料。单一类型的支架材料存在各自的优缺点，仅靠单一材料很难满足骨组织工程支架材料的要求。理想的骨组织工程支架材料的制备应考虑到无机陶瓷类材料、合成聚合物材料和天然生物衍生材料的优缺点，将有机材料和无机材料通过合适的方法组合成复合材料，模拟天然骨基质组成成分，通过促进种子细胞的粘附、增殖和分化，从而发挥最佳的成骨能力。纳米羟基磷灰石/聚乳酸(n—HA/PLA)就是根据这一原理将无机材料纳米羟基磷灰石与有机材料聚乳酸通过特殊工艺聚合而成的新型生物材料，本实验旨在研究复合生物材料n—HA/PLA作为组织工程支架材料的可行性。

    1 材料和方法

    1.1 MSCs的分离培养与诱导：取健康新西兰白兔2只，双侧胫骨结节处备皮消毒，无菌条件下用骨穿针穿刺抽取红骨髓8ml，加入含肝素的DMEM培养液(Gibco公司)，混匀后加入3ml淋巴细胞分离液(Gibco公司)，1800r/min离心10min，吸除中间层细胞后再离心，所得细胞沉淀以1×10⁶/ml密度接种于含15%胎牛血清的DMEM培养液中，于37℃、5%CO₂饱和湿度条件下培养。待细胞相互融合达90%生长面积时用0.25%胰蛋白酶(Sigma公司)消化传代培养。细胞传至3代时，移入含10～8mol/L地塞米松、50mg/L维生素C和10～2mol/Lβ-磷酸甘油钠的DMEM培养液诱导培养3天(文章出处：蓝旭梁军葛宝丰等)