静脉移植５－ＢｒｄＵ标记骨髓间充质干细胞参与创面愈合的作用研究(1)

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     [摘要]目的：探讨经尾静脉移植入体内的骨髓间充质干细胞(BMSCs)参与皮肤创面愈合的情况。方法：以SD大鼠为研究对象，分离、培养并鉴定大鼠BMSCs。制作大鼠全层皮肤缺损动物模型；经尾静脉注入经5一BrdU标记的骨髓间充质干细胞，于不同时间点(3、7、14、21、28天)观察移植细胞参与创面愈合的情况。结果：经流式细胞仪鉴定细胞表达CD29、CD90表达阳性：CD45表达呈阴性；经体外标记的5一溴脱氧尿嘧啶标记率，90%；标记后的干细胞进行移植4周后，实验组大鼠创面局部及边缘可见BrdU标记的阳性细胞聚集，对照组中未发现明显的聚集现象。结论：5-BrdU完全能够满足移植细胞的标记需要。经尾静脉注射移植入体内的BMSCs可能参与皮肤创面愈合。

    [关键词]骨髓间充质干细胞；5-BrdU；细胞移植；创面愈合

    [中图分类号]Q813.1⁺1 [文献标识码]A [文章编号]1008—6455(2007)01—0028-03

    创伤是外科的一大类疾病，随着对创伤愈合研究的进一步深入，发现参与创面修复的细胞不仅有定居于损伤组织局部的干细胞，骨髓来源的干细胞(bone marrow derived cells)在创伤愈合中的作用逐渐受到重视。骨髓间充质干细胞(BMSCS)是存在于骨髓组织中的一类成体干细胞(adun stem cells，AS)，在一定的诱导条件下，BMSCs具有向成骨细胞、软骨细胞、肌腱细胞、脂肪细胞，骨骼肌、平滑肌、造血支持基质等中胚层细胞分化的能力；同时可以向外胚层的星形胶质细胞、神经元、表皮或上皮组织及内胚层的肝卵圆细胞、血管内皮细胞和心肌细胞分化。BMSCs跨系、甚至跨胚层横向分化的可塑性及其强大的分化潜能使得它可为组织修复提供各种细胞材料。

    我们通过建立经体外5-BrdU标记的骨髓间充质干细胞移植和局部皮肤缺损动物模型，研究骨髓间充质干细胞在创面愈合过程中的迁移、聚集和增殖情况，以期完善对创面愈合机制的认识。

    1 材料和方法

    1.1材料：雄性SD大鼠(东南大学实验动物中心)，L-DMEM培养基(美国Gibco公司)，胎牛血清(FCS，杭州四季青生物材料有限公司)，胰蛋白酶(华美生物工程公司)(文章出处：马晓菁张娇章庆国)